Стас Поваляев

Обьяви переменные на уровне класса и дай им свойство ObjectProperty(None) для всех виджетов ,далее через функцию напиши метод изменения цвета , и в кv файле дай команду кнопке

По исходному условию, можно написать regexp или "стейт машину" с хардкодом содержимого файла, но если содержимое будет меняться - код надо будет переписывать. Ниже вариант проще, но он отличается от исходного условия.

Если нет ограничения на формат файла и код надо вписывать всегда в однотипные места, можно использовать модуль шаблонов jinja2 либо плейсхолдеры для работы со строками, вида:

your_new_code="""
    print(123)
    return False
"""
...
updated_text = """
...
class MainApp(App):
    def build(self):
        main_layout = FloatLayout()
        {some_text}
...
""".format(some_text=your_new_code)

Ну самый лобовой способ - изменить файл-шаблон так (сокращено):

class MainApp(App):
    def build(self):
        main_layout = FloatLayout()
        # INSERT CODE HERE
        return main_layout
 
if __name__ == '__main__':
    app = MainApp()
    app.run()

Тогда можно будет сделать просто

with open('file.py', 'rt', encoding='utf-8') as src:
    data = src.read()
with open('file2.py', 'wt', encoding='utf-8') as dest:
    dest.write(data.replace('# INSERT CODE HERE', 'тут твой код'))

Разумеется, строка # INSERT CODE HERE не должна встречаться в других местах файла-шаблона.
Также подразумевается, что файл-шаблон сам по себе, и не изменяется программно - вместо этого результат записывается в другой файл, который уже используется.

FloatLayout:   #Общий
        id:fl1
        orientation: 'vertical'
        canvas:
            Rectangle:
                source: 'Fon.jpg'
                size: self.size
                pos: self.pos
        #rows: 6

Читаем строки из файла в виде списка

with open('tmp.txt', 'r') as NewPrj_kv:
    lines = NewPrj_kv.readlines()

Дальше со списком делайте, что хотите. Новую строку вставляйте в конец, в определенное место, через insert lines.insert(2, 'new line\n'), удаляйте, через del lines[X] и тд

Потом так же список записываем

with open('tmp.txt', 'w') as NewPrj_kv:
    NewPrj_kv.writelines(lines)